對(duì)簡(jiǎn)單，可用于那些對(duì)厭氧要求相對(duì)較低的一般厭氧菌的培養(yǎng)，如堿性焦性沒食子酸法、厭氧罐培養(yǎng)法、庖肉培養(yǎng)基法等。本實(shí)驗(yàn)將主要介紹這三種，它們都屬于**基本也是**常用的厭氧微生物培養(yǎng)技術(shù)。其中有些厭氧微生物要求高的培養(yǎng)研究，對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器也有較高的要求，如主要用于嚴(yán)格厭氧菌分離和培養(yǎng)的亨蓋特技術(shù)、厭氧培養(yǎng)箱(手套箱)法等。厭氧培養(yǎng)箱已逐漸普及，本實(shí)驗(yàn)也作簡(jiǎn)要介紹。 

1．堿性焦性沒食子酸法 

焦性沒食子酸與堿溶液(NaOH、Na2CO3或NaHCO3)作用后形成易被氧化的堿性沒食子鹽，能通過氧化作用而形成黑、褐色的焦性沒食子橙從而除掉密封容器中的氧。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是無需特殊及昂貴的設(shè)備，操作簡(jiǎn)單，適用于任何可密封的容器，可迅速建立厭氧環(huán)境，適用于前期實(shí)驗(yàn)性探索研究；而其缺點(diǎn)是在氧化過程中會(huì)產(chǎn)生少量的一氧化碳，對(duì)某些厭氧菌的生長(zhǎng)有抑制作用，同時(shí)，NaOH的存在會(huì)吸收掉密閉容器中的二氧化碳，對(duì)某些厭氧菌的生長(zhǎng)不利。用NaHCO3。代替NaOH，可部分克服二氧化碳被吸收問題，但卻又會(huì)導(dǎo)致吸氧速率的降低。當(dāng)然，大批量厭氧培養(yǎng)需消耗大量實(shí)驗(yàn)藥品，并產(chǎn)生大量廢液，可能引起環(huán)境污染。 

2．厭氧罐培養(yǎng)法 

利用一定方法在密閉的厭氧罐中生成一定量的氫氣，而經(jīng)過處理的鈀或鉑可作為催化劑催化氫與氧化合形成水，從而除掉罐中的氧而造成厭氧環(huán)境。由于適量的CO2(2％～10％)對(duì)大多數(shù)的厭氧菌的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，在進(jìn)行厭氧菌的分離時(shí)可提高檢Ⅲ率，所以一般在供氫的同時(shí)還向罐內(nèi)供給一定的CO2。厭氧罐中H2及CO2的生成可采用鋼瓶灌注的外源法，但更方便的是利用各種化學(xué)反應(yīng)在罐中自行生成的內(nèi)源法，例如，鎂與氯化鋅遇水后發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生氫氣，碳酸氫鈉加檸檬酸水后產(chǎn)生CO2： 

Mg+ZnCl2+2H2O→MgCl2+Zn(OH)2+H2↑ C6H8O7+3NaHCO3→Na3(C6H5O7)+3H2O+3CO2↑
厭氧罐中使用的厭氧度指示劑一般都是根據(jù)亞甲藍(lán)(methylene blue)在氧化態(tài)時(shí)呈藍(lán)色而在還原態(tài)時(shí)呈無色的原理設(shè)計(jì)的。目前，厭氧罐技術(shù)早已商業(yè)化，有多種品牌的厭氧罐產(chǎn)品(厭氧罐罐體，催化劑、氣體發(fā)生袋、厭氧指示劑)可供選擇。它實(shí)際上已經(jīng)同厭氧培養(yǎng)箱類似，但因?yàn)轶w積小、攜帶方便，使用起來十分方便。圖3—13顯示了一般常用的厭氧罐的基本結(jié)構(gòu)。