1 基本要求
(1) 掌握細胞培養概念、細胞培養箱分類、基本原理和基本結構。 (2) 熟悉細胞培養技術。
(3) 了解細胞培養箱常見故障處理及儀器的進展。
2 重點難點
(1) 細胞培養概念、細胞培養技術。
(2) 細胞培養箱分類、基本原理、基本結構和使用方法。
3 講授學時
建議4學時
4 內容提要
4.1 概述
4.1.1 培養細胞的類型及其特點
分為貼附型和懸浮型兩大類。具有接觸抑制和密度抑制的特性。 4.1.2 培養細胞的增殖過程
傳代（passage 或subculture）。從體內取出細胞接種培養到**次傳代叫原代培養，原代細胞一經傳代后便稱為細胞系（cell line）。 4.1.3 培養細胞的環境
培養細胞需要特定的培養基和培養設備。培養細胞在培養皿或培養瓶中生長，浸浴于培養液，并需要特有的環境，包括一定的溫度、濕度和氣體成分。
4.2細胞培養的技術
4.2.1 細胞分離和原代（初代）培養
（1）細胞懸液的制備 (2) 原代培養 (3)標本接種 4.2.2 培養細胞的傳代 (1)次代細胞培養 (2)傳代
4.3細胞培養微生物污染的檢測
4.3.1 霉菌和細菌污染 霉菌和細菌污染較易發現，細胞生長停止并有中毒表現。
4.3.2 支原體污染 支原體污染是一個常見而又棘手的問題，它可致細胞增殖緩慢，甚**從培養器皿脫落。用能與DNA特異性結合的熒光染料Hoechst 33258使支原體DNA著色，置熒光顯微鏡下觀察，可見散在于細胞周圍或附于細胞膜表面的亮綠色小點為支原體污染.
4.4 細胞培養技術的應用
4.4.1 細胞融合 細胞融合**典型的應用是單克隆抗體技術。 4.4.2 核移植 4.4.3 基因轉移
4.4.4 細胞治療與組織工程
4.5. 電熱恒溫培養箱
4.5.1 電熱恒溫培養箱結構和原理
4.5.2 電熱恒溫培養箱使用注意事項 **重要的是隔水層的加水和智能控溫儀的溫度設定
4.6.2 CO2培養箱的結構特點和使用 結構核心部分主要是CO2調節器、溫度調節器和濕度調節裝置 4.6.3 CO2培養箱的進展
4.7.1
厭氧培養箱的厭氧狀態產生
厭氧培養箱是通過催化除氧系統和自動連續循環換氣系統保持箱內的厭氧狀態。
4.7.2 厭氧培養箱的結構與使用 由手套操作箱和傳遞箱兩個部分組成，操作箱內還附有小型恒溫培養箱。
